클로닝 벡터
클로닝 벡터는 유전 공학에서 특정 DNA 조각을 숙주 세포 내로 운반하고 복제하는 데 사용되는 DNA 분자이다. 벡터는 독립적으로 복제 가능한 DNA 분자로, 일반적으로 플라스미드, 박테리오파지, 바이러스 등이 사용된다. 클로닝 벡터의 주요 기능은 삽입하고자 하는 외래 유전자(insert)를 담아 숙주 세포 내에서 안정적으로 유지하고, 필요에 따라 복제하여 그 유전자의 발현을 가능하게 하는 것이다.
클로닝 벡터는 일반적으로 다음과 같은 구성 요소를 갖는다.
- 복제 원점 (Origin of Replication, Ori): 숙주 세포 내에서 벡터가 자율적으로 복제될 수 있도록 하는 DNA 서열이다. 복제 원점이 있어야 벡터가 세포 분열 시 딸 세포로 전달될 수 있다.
- 선별 마커 (Selectable Marker): 항생제 내성 유전자 등이 사용되며, 벡터가 도입된 세포만을 선택적으로 생존시켜 다른 세포와 구별할 수 있도록 한다. 형질전환된 세포를 선별하는 데 필수적인 요소이다.
- 다중 클로닝 부위 (Multiple Cloning Site, MCS) 또는 제한 효소 자리 (Restriction Site): 여러 제한 효소에 의해 절단될 수 있는 짧은 DNA 서열로, 외래 유전자를 벡터에 삽입하기 위한 위치를 제공한다. 다양한 제한 효소를 사용하여 원하는 DNA 조각을 삽입할 수 있도록 설계된다.
클로닝 벡터는 용도에 따라 다양한 종류가 존재한다.
- 플라스미드 벡터: 박테리아에서 유래한 원형 DNA 분자로, 비교적 작은 DNA 조각을 클로닝하는 데 적합하다.
- 파지 벡터: 박테리오파지(바이러스)의 DNA를 기반으로 하며, 플라스미드보다 큰 DNA 조각을 클로닝할 수 있다.
- 코스미드 벡터: 플라스미드와 파지의 특징을 결합한 벡터로, 더 큰 DNA 조각을 클로닝할 수 있다.
- 인공 염색체 (Artificial Chromosome): YAC (Yeast Artificial Chromosome), BAC (Bacterial Artificial Chromosome) 등이 있으며, 매우 큰 DNA 조각을 클로닝하는 데 사용된다.
클로닝 벡터는 유전자 복제, 단백질 생산, 유전자 치료 등 다양한 생명 과학 연구 및 응용 분야에서 핵심적인 역할을 수행한다.