글래디스 마리아 나이트(영어: Gladys Maria Knight, 1944년 5월 28일 ~ )는 미국의 가수, 배우, 사업가이다. 미국 조지아주 애틀랜타에서 태어났으며, '소울의 여제(Empress of Soul)'라는 별칭으로 널리 알려져 있다.
1950년대부터 음악 활동을 시작하여, 가족 그룹인 글래디스 나이트 & 더 핍스(Gladys Knight & the Pips)와 함께 1960년대, 1970년대, 1980년대에 걸쳐 다수의 히트곡을 발표했다. 그룹 멤버로는 그녀의 형제 머럴드 "버바" 나이트(Merald "Bubba" Knight)와 사촌 윌리엄 게스트(William Guest), 에드워드 패튼(Edward Patten)이 포함되었다.
그래미상을 총 7회 수상하였으며(솔로 4회, 더 핍스와 3회), 빌보드 핫 100, R&B, 가스펠, 어덜트 컨템포러리 등 여러 차트에서 1위를 기록했다. 대표적인 히트곡으로는 "Midnight Train to Georgia", "Neither One of Us (Wants to Be the First to Say Goodbye)", "I Heard It Through the Grapevine", "That's What Friends Are For"(자선 싱글) 등이 있다.
주요 음악 장르는 리듬 앤 블루스(R&B), 소울, 팝, 가스펠, 펑크, 두왑에 걸쳐 있으며, 머라이어 캐리, 휘트니 휴스턴, 메리 제이 블라이즈 등 후대의 많은 알앤비 가수들에게 영향을 끼친 것으로 평가된다. 음악 외에도 영화와 텔레비전에서 배우로 활동하였으며, 자서전을 출간하는 등 작가로서도 활동했다. 2022년에는 미국 국가 예술 훈장(National Medal of Arts)을 수훈하였다.
